产品货号:
SNM177
中文名称:
胆碱酯酶测定试剂盒(比色法)
英文名称:
Cholinesterase assay kit
产品规格:
50管/48样
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒可测各种动物组织、血清(浆)、全血及培养细胞、细胞培养上清液中胆碱脂酶活力。
保存:2~8℃,有效期6个月。
一、血清(浆)、组织的测定:
二、全血的测定:
相关搜索:胆碱酯酶测定试剂盒(比色法),胆碱酯酶,CHE,Cholinesterase assay kit
血液及组织中CHE使乙酰胆碱水解成胆碱和乙酸,未被分解的剩余乙酰胆碱与羟胺作用生成乙酰羟胺,再与铁离子在酸性溶液中形成棕色复合物,根据颜色深浅推算出酶的活力。
胆碱脂酶主要在肝细胞中产生,主要用于估计肝脏的储备能力和肝脏疾病的预后。肝脏疾病时活力常降低,降低程度往往与病情严重程度有关。肝硬化代偿期活力明显下降,在肝昏迷时最为显著,但在阻塞性黄疸时无改变。阿米巴肝脓肿此酶下降明显,治疗后在短期内迅速恢复正常,帮对阿米巴肝病研究有一定帮助。在一些肝外疾患,如全身营养不良,重度贫血、癌症、晚期血吸虫病、败血病、重症结核病(尤其是肾结核或浆膜结核)等均可中度或重度降低,此酶增高见于肾病综合症、甲状腺机能亢进、糖尿病、高血压、高血脂。
- 快速简便:全程约30分钟,可测50例左右样本。
- 再现性好:变异系数CV=1.2%。
- 回收试验:X =102%。
- 受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
- 测试面广:可测动物血清(浆)、组织,效果均佳。
组分 | 内容 | 规格 | 保存 |
试剂一 | 溶液 | 60mL | 室温 |
试剂二 | 乙酰胆碱粉剂 | 1支 | -20℃ |
稀释液 | 5mL | 4℃ | |
试剂三 | 甲粉 | 1支 | 室温 |
乙液 | 30mL | ||
丙液 | 30mL | ||
试剂四 | 溶液 | 30mL | 室温 |
试剂五 | 溶液 | 20mL | 室温 |
试剂六 | 粉剂 | 1瓶 | 4℃避光 |
稀释液 | 30mL |
保存:2~8℃,有效期6个月。
- 80μmol/mL乙酰胆碱底物贮备液的配制:将1支乙酰胆碱粉剂倒入5mL稀释液中溶解,4℃保存。
- 8μmol/mL乙酰胆碱应用液的配制∶按80μmol/mL乙酰胆碱底物贮备液︰试剂一=1︰9的比例进行稀释,现用现配,用多少配多少。
- 试剂三应用液的配制:测试前将甲粉倒入乙液中,充分摇匀,根据需要量将甲乙混合液与丙液等量混合,充分混匀,配成试剂三应用液,现用现配。
- 试剂六应用液的配制:测试前将稀释液倒入粉剂中,充分混匀溶解后备用。
一、血清(浆)、组织的测定:
- 样本前处理:
- 血清(浆):直接进行检测。
- 组织样本:准确称取组织重量,按重量(g):体积(mL)=1:9的比例,加入9倍的生理盐水,冰水浴条件下匀浆,制成10%的匀浆液,2500转/分,离心10分钟,取上清液待测。同时用BCA法或考马斯亮蓝法试剂测定组织蛋白。
- 血清(浆):直接进行检测。
- 操作表:
成分(mL) 空白管 对照管 测定管 待测样本 0.05 双蒸水 0.30 0.05 8μmol/mL乙酰胆碱应用液 0.25 0.25 试剂一 0.5 0.5 0.5 混匀,37℃水浴20分钟 试剂三应用液 1.0 1.0 1.0 试剂四 0.5 0.5 0.5 试剂五 0.25 0.25 0.25 试剂六应用液 0.5 0.5 0.5 混匀,3500转/分离心10分钟,取上清,520nm,1cm光径,空白管调零,测各管吸光值。 - 血清样本计算:
- 单位定义:每毫升血清在37℃和底物作用20分钟,分解1μmol乙酰胆碱为1个活力单位。
- 计算公式:
C标准:乙酰胆碱浓度,8μmol/mL;血清CHE活力
(U/mL)= A对照-A测定 ×C标准×V标准× 1 A对照 V样
V标准:乙酰胆碱用量,0.25mL;
V样:样本取样量,0.05mL。
- 单位定义:每毫升血清在37℃和底物作用20分钟,分解1μmol乙酰胆碱为1个活力单位。
- 组织中CHE的计算:
- 单位定义:每毫克蛋白的组织在37℃和底物作用20分钟,分解1mol乙酰胆碱为1个活力单位。
- 计算公式:
C标准:乙酰胆碱浓度,8μmol/mL;组织CHE活力
(U/mgprot)= A对照-A测定 ×C标准×V标准× 1 A对照 V样×Cpr
V标准:乙酰胆碱用量,0.25mL;
V样:样本取样量,0.05mL;
Cpr:组织匀浆蛋白浓度,mgprot/mL(prot指蛋白)。
- 单位定义:每毫克蛋白的组织在37℃和底物作用20分钟,分解1mol乙酰胆碱为1个活力单位。
二、全血的测定:
- 样本前处理:轻轻颠倒肝素抗凝全血使之均匀后取0.1mL,再加入0.4mL冷双蒸水,充分混匀1分钟,静置15分钟,制备的5倍溶血液对光观察澄清透亮待测。
- 操作表:
成分(mL) 空白管 对照管 测定管 待测样本 0.1 双蒸水 0.35 8μmol/mL乙酰胆碱应用液 0.25 0.25 试剂一 0.5 0.5 0.5 混匀,37℃水浴20分钟 试剂三应用液 1.0 1.0 1.0 试剂四 0.5 0.5 0.5 试剂五 0.25 0.25 0.25 试剂六应用液 0.5 0.5 0.5 待测样本 0.1 混匀,3500转/分离心10分钟,取上清,520nm,1cm光径,空白管调零,测各管吸光值。 - 计算方法:
- 单位定义:每毫升全血在37℃和底物作用20分钟,分解1mol乙酰胆碱为1个活力单位。
- 计算公式:
C标准:乙酰胆碱浓度,8μmol/mL;CHE活力
(U/mL)= A对照-A测定 ×C标准×V标准× 1 ×N A对照 V样
V标准:乙酰胆碱用量,0.25mL;
V样:样本取样量,0.1mL;
N:样本测试前稀释倍数。
- 单位定义:每毫升全血在37℃和底物作用20分钟,分解1mol乙酰胆碱为1个活力单位。
相关搜索:胆碱酯酶测定试剂盒(比色法),胆碱酯酶,CHE,Cholinesterase assay kit